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利用Gomori法比较浸染、滴染和倒扣法染色

更新时间:2020-07-08 08:37点击:

[关键词]网状纤维;特殊染色:倒扣法
 
 网状纤维由Ⅲ型胶原蛋白构成,网状纤维染色原理为,网状纤维表面的糖蛋白与银化合物结合,经甲醛还原为金属银沉淀在纤维内.在应用方面主要用于鉴别上皮性与非上皮性肿瘤、区别某些间叶组织肿瘤和判断基底膜的完整性等方面.本文采用 Gomori 法对浸染、滴染和倒扣法染色进行比较研究。
 
  1 材料与方法
 
  1. 1 材料 标本采用深圳市第二人民医院病理科 2014 年至今的标本,其中肉瘤 20 例、骨髓 20 例、肝硬化及肝癌 20例。网染试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司。所用倒扣法染色器皿为试剂瓶盖切制。
 
  1. 2 方法
  
  1. 2. 1 浸染法 按照 Gomori 法配制银氨溶液,操作步骤按参考文献。
 
  1. 2. 2 滴染法 按试剂盒说明书操作步骤进行。
 
  1. 2. 3 倒扣法 采用迈新网染试剂盒,基本步骤同滴染法,在银氨溶液反应中采用特制容器,将银氨溶液滴加在容器上,切片倒扣在容器之上进行反应。
 
  2 结果
 
  浸染法染出的切片网状纤维呈黑色,背景干净,网状纤维显示清晰 ; 滴染法染出的切片背景有较多银颗粒沉淀,网状纤维显示尚可,部分区域无法判读; 倒扣法染出的切片网状纤维呈黑色,胶原纤维呈黄棕色,细胞核呈灰黑色,背景干净,网状纤维显示清晰,与浸润法效果一致.
  
  3 讨论
 
  本实验中的倒扣法是对网染出现的不足或缺点进行改进而摸索出来的一种较好的染色法。浸染法是比较传统有效染色法,但每次使用的最小试剂也要 50ml,相对于滴染来说浪费试剂并有污染。目前试剂盒的使用不仅节约了配制试剂的时间并且极大地节约了试剂的用量,对成本和环境保护均有利。试剂盒的使用方法为滴染,由于银氨溶液反应所产生的银颗粒在重力的作用下可沉积在玻片和组织上,造成切片的背景污染,影响切片的质量。故制作了一种小反应皿,只需在反应皿上滴加银氨溶液,并将用记号笔在其背面标记组织性状,将切片倒扣在器皿之上使之反应,而沉淀则沉积到器皿里,并且在反应皿与切片间形成密闭的空间,以隔绝空气对反应的影响,只在器皿周围形成沉积( 只需在实验结束后擦拭掉即可) ,不影响染色结果。其染出效果媲美浸染法,又具备滴染法的优点。
 
  倒扣法很好地解决了染色沉淀及挥发等问题,不仅在网状纤维染色中取得良好的效果,在挥发性染液及需长时间反应的特殊染色中均能发挥其优点,如苏丹Ⅲ染色、Mallory 磷钨酸苏木精染色法、弹性纤维染色等等。
 
  参考文献:
 
  [1] 李甘地,丁彦青,马大烈,等。 组织病理技术[M]. 北京: 人民卫生出版社,2002. 7 -8.
  [2] 姜元庆,马 越,王桂芝,等。 病理检验技术[M]. 第 1 版。 北京。 人民卫生出版社,2002. 65 -68.

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