27医学论文范文网

主页
分享医学论文范文

去甲肾上腺素和内皮素在应激损伤中的作用

更新时间:2020-05-08 08:26点击:

    [摘要]目的 探索低频电刺激对不同动物血内激素水平的影响。方法分别给子予中国树朐、Wistar 大鼠、BALB / c小鼠低频电刺激后,分别在12、 24、36 h各取- -组动物采血,用放射免疫法检测去甲肾上腺素(noradrena-line, NA)、 内皮素( endothelin,ET) 水平。 结果给予中国树响、Wistar 大鼠、BALB / c小鼠低频电刺激后12、 24、 36 h, NA、ET水平比对照组显着升高( P < 0. 01) , 给予利血平后24 h,再给子相同电刺激,NA、 ET水平比单纯电刺激组明显降低( P <0. 05 o. 01) . 不同动物对同-剌激的应激敏感程度不同,敏感程度按照中国树朐、Wistar 大鼠、BALB/c 小鼠的顺序依次降低。结论低频电刺激能促进中国树的、Wistar大鼠、BALB/c 小鼠NA、ET释放,利血平具有降低机体对低频电刺激的应激作用。
    [关键词]低频电刺激; 激素; 应激;中国树朐:大鼠
 
社会环境因素对人类行为生理和健康影响的研究,是目前生命科学与人口健康研究的重要课题之一。随着社会的高速发展,工作和生活节奏不断加快,时代对人类的要求也愈来愈高,人类将更多地处于应激之中,应激对人类的危害也将不断加剧。机体在遭遇紧急情况时,如恐惧、惊吓、焦虑、创伤或失血等情况,交感神经活动加强,去甲肾上腺素( nora-drenaline,NA) 、肾上腺素 ( adrenaline,A) 的分泌量大大增加。NA、A 作用于中枢神经系统细胞膜受体,激活腺苷酸环化酶,将三磷酸腺苷( ATP) 催化生成环-磷酸腺苷 ( cAMP) ,cAMP 激活蛋白激酶 A( PKA) ,使蛋白质磷酸化,产生细胞反应,从而提高机体的兴奋性,使机体处于警觉状态,反应灵敏,以适应在应急情况下的需要,或使机体发病[1],甚至猝死[2].内皮素( endothelin,ET) 是调节心血管功能的重要因子,对维持基础血管张力与心血管系统稳态起重要作用。内皮素是迄今为止发现的作用最强的缩血管物质。并且缩血管升血压效应还可反射性引起心率抑制,造成心肌供血不足、代谢紊乱,内皮素( ET) 与去甲肾上腺素是引起猝死的关键因素,在应激损伤过程中具有至关重要的作用。
 
  本文给予中国树鼩、Wistar 大鼠、BALB/c 小鼠低频电刺激,观察相同刺激对不同种类动物应激反应的程度,探索 NA、ET 在应激损伤中的作用,为法医病理学研究和应激损伤案例分析提供参考资料。
 
  1 材料和方法
 
  1. 1 材料
 
  1. 1. 1 实验动物
 
  中国树鼩( 滇西亚种,Tupaia belangeri chinen-sis[3]) ,90 只,雄性,体重 120 ~125 g,购于中国科学院昆明动物研究所【SCXK( 滇) K2013-0003】。SPF级 Wistar 大鼠,90 只,雄性,体重 200 ~ 210 g.SPF级 BALB/c 小鼠,90 只,雄性,体重 20 ~22 g,大、小鼠均购于甘肃省中医学院科研实验中心【SCXK( 甘) 2011-0001】。
 
  1. 1. 2 试剂
 
  利血平: 批号: 130406,广东邦民制药厂有限公司生产; 去甲肾上腺素( NA) 、内皮素( ET) 放免检测试剂盒,北京北免东雅生物技术研究所生产。
 
  1. 1. 3 仪器
 
  GC-1200 γ 计数放免仪: 美国 Picker 公司制造;Dossy-2H 多通路生理参数采集存储仪: 购于成都达硕生物科技有限公司。
 
  1. 2 实验方法
 
  1. 2. 1 动物分组
 
  选取中国树鼩、SPF 级 Wistar 大鼠、BALB/c 小鼠各 90 只。中国树鼩在实验室饲育笼( 250 cm ×150 cm × 150 cm 连接 50 cm × 30 cm × 20 cm 休息室) 内饲养,每笼 5 只; Wistar 大鼠、BALB/c 小鼠在独立通气笼( individual ventilated cages,IVC) 内饲养,自由饮水进食,人工光照 12 h.实验室温度 18~ 22℃ ,IVC 内温度 ( 22 ± 0. 2 ) ℃ ,湿度 55% ~65% ,适应 7 d.每种动物按体重随机各分为 3 组,每组 30 只。电刺激组( 给予脉冲直流电刺激[4]) .利血平组( 各组在饮水中加入利血平 2mg/100mL,次日给予电刺激,刺激条件同电刺激组) .
 
  1. 2. 2 动物实验、标本采集和检测实验前,每只动物均剃去左侧前、后肢体毛各约1. 0 mm × 1. 0 mm,实验时,将 Dossy-2H 多通路生理参数采集存储仪皮肤电极片( 面积 0. 7 mm × 0. 7mm) 粘贴于去毛处,外用尼龙带扎紧。对照组和实验组分别在实验( 电刺激) 后 12、24、36 h 各取 10 只动物( 各组采血前禁食 6 h,不禁水) ,用乙醚吸入麻醉,从心脏采血 1 mL,3000 r/min 离心 10 min,分离血清,冻存待测。全部血清用 GC-1200 γ 计数放免仪检测 NA、ET 水平。
 
  1. 3 统计学分析
 
  实验数据采用 SPSS 17. 0 软件进行统计学处理。低频电刺激对动物血激素水平的影响用百分比表示,组间差异采用单因素方差分析,用均数 ± 标准差( x ± s) 表示,以 P <0. 05 为差异有统计学意义。
 
  2 结果
 
  2. 1 低频电刺激对中国树鼩血激素水平的影响
 
  电刺激后12、24、36 h 检测,电刺激组中国树鼩血内皮素( ET) 水平比对照组分别升高了 79. 84%、77. 03% 、69. 52% ( P < 0. 01) ; 利血平组( 先给予利血平,再给予相同的低频电刺激) 中国树鼩血 ET 水平比电刺激组分别降低了35. 19%、35. 38%、33. 80%( P< 0. 01) ; 电刺激组中国树鼩血 NA 水平比对照组分别升高了72. 51%、64. 99%、60. 48%( P <0. 01) ,利血平组中国树鼩血 NA 水平比电刺激组分别降低了65. 38% 、59. 56% 、52. 60% ( P < 0. 01) .见图 1.
 
  2. 2 低频电刺激对 Wistar 大鼠血激素水平的影响
 
  电刺激后12、24、36 h 检测,电刺激组 Wistar 大鼠内皮素( ET) 水平比对照组分别升高了 68. 05%、47. 30% 、24. 28% ( P < 0. 01) ; 利血平组 Wistar 大鼠血 ET 水 平 比 电 刺 激 组 分 别 降 低 了 32. 54%、26. 85% 、14. 28% ( P < 0. 05 ~ 0. 01) ; 电刺激组 Wist-ar 大鼠血 NA 水平比对照组分别升高了 66. 12% 、53. 62% 、44. 39% ( P < 0. 01) ,利血平组 Wistar 大鼠血 NA 水 平 比 电 刺 激 组 分 别 降 低 了 69. 84%、65. 10% 、60. 38% ( P < 0. 01) .
 2. 3 低频电刺激对 BALB /c 小鼠血激素水平的影响
 
  电刺激后 12、24、36 h 检测,电刺激组 BALB/c小鼠血内皮素 ( ET) 水平比对照组分别升高了67. 39% 、62. 57% 、55. 59% ( P < 0. 01 ) ; 利血平组BALB / c 小鼠血 ET 水平比电刺激组分别降低了20. 44% 、17. 82% 、19. 27% ( P < 0. 05 ~ 0. 01) ; 电刺激组 BALB/c 小鼠血 NA 水平比对照组分别升高了27. 58% 、21. 72% 、14. 83% ( P < 0. 05 ) ,利血平组BALB / c 小鼠血 NA 水平比电刺激组分别降低了17. 25% 、24. 18% 、16. 04% .
 3 讨论
 
  为了探索社会环境压力对人们身心健康的影响,很多学者对相关的动物模型进行了长期的研究,发现慢性环境刺激使中国树鼩血象[5]、血激素水平[6]、生殖系统[7]发生病理性变化。慢性束缚应激能引起大鼠学习记忆能力降低[8]、肠功能紊乱[9],热刺激造成小鼠肝脏、十二指肠和空肠严重损伤[10].反复电刺激清醒状态下大鼠上矢状窦[11 ,大鼠出现抑郁的行为。旋转刺激能引起大鼠血促肾上腺皮质激素( adrenocorticotropic hormone) 、促肾上腺皮质素释放激素( corticotropin releasing hormone)水平升高[12],激发肾上腺皮质激素的释放,增进抵抗力。高浓度的 NA 加速内皮细胞合成并释放内皮素( ET) 和血小板活化因子( platelet-activating fac-tor)[13].升高的 ET 不仅本身有强烈的缩血管作用,而且增强 NA 的缩血管作用[14].睾酮( testoster-one) 水平下降[15],可使大鼠血管内皮受损,ET 释放增加[16].NA、ET 的过度分泌,在引起血管收缩的同时加剧血小板的激活并释放血栓素( thrombox-ane) ,活化的血小板因子( PAF) 又可进一步促进内皮细胞释放 ET,PAF 加速血小板集聚,引起心、脑血管痉挛和血栓形成,造成机体损伤、发病甚至猝死。
 
  本文实验结果显示,给予中国树鼩、Wistar 大鼠、BALB / c 小鼠电刺激后,各组动物血 NA、ET 水平均显着升高( 均 P <0. 01) .给予利血平后再给予相同的电刺激后 12 h 测定,各组动物 NA、ET 水平比电刺激组明显降低( P <0. 05 ~0. 01) ,其中 ET 降低程度依 次 为 中 国 树 鼩 ( 35. 38%) > Wistar 大 鼠( 32. 54%) > BALB/c 小鼠( 20. 44%) .实验结果表明,在应激反应中,因应激原种类、动物种属、性别、生理状态、应激状态的不同而有所差异; 社会环境刺激能显着增加机体( 人、动物) 血液中 NA、ET 水平;NA、ET 参与高血压、心脏病乃至猝死的病理过程;利血平能阻碍体内 NA 的合成和释放,使交感 - 肾上腺髓质轴和下丘脑-垂体-性腺轴的兴奋降低,缓解了机体对应激损伤的反应,对机体有保护作用。
 
  参 考 文 献
 
  [1] 刘水平,陈玉川,郭 薇,等。 挤压伤大鼠血浆内皮素含量与心脏损伤的关系[J]. 中山医科大学学报,2002,23( 1) : 27- 28.
 
  [2] 李军杰,叶平,骆雷鸣,等。 慢性应激与血清皮质醇、肾上腺素和去甲肾上腺素的关系 [J]. 解放军医学院学报,2010,31( 6) : 558 - 559.
 
  [3] 王应祥。 中国树鼩的分类研究 [J]. 动物学研究,1987,8( 3) : 213 -230.
 
  [4] 俞发荣,连秀珍,张振南,等。 即刻刺激对中国树鼩体内DA、cMAP、cMGP 水平的影响 [J]. 中国法医学杂志,2014,29( 6) : 548 - 550.
 
  [5] 连秀珍,张红梅,谢明仁,等。 慢性环境刺激对中国树鼩行为方式的影响[J]. 生态科学,2012,31( 6) : 666 -670.
 
  [6] 俞发荣,常青云,连秀珍,等。 生活环境条件对中国树鼩血激素水平和心理行为的影响 [J]. 中国实验动物学报 2014,22( 3) : 62 - 66.
 

推荐文章

在线客服系统